猪囊尾蚴CE18重组蛋白的复性纯化及抗原性鉴定

作者：张少华; 贾万忠; 骆学农; 景志忠; 吴国华; 郑亚东; 郭爱疆; 才学鹏

来源：生物工程学报, 2008, (08): 1490-1495.

DOI：10.13345/j.cjb.2008.08.022

• 猪囊尾蚴
• CE18重组蛋白
• 复性
• 纯化
• 透析
• 凝胶过滤层析 Cysticercus cellulosae
• rCE18
• renaturation
• purification
• dialysis
• gel filtration chromatography

猪囊尾蚴CE18重组蛋白(rCE18)在大肠杆菌表达后形成包涵体,为了获得高纯度的、有生物活性的rCE18,本研究采用超声破碎菌体,0.2%、2%DOC(脱氧胆酸钠)逐次洗涤包涵体及0.9%SKL(十二烷基肌氨酸钠)溶解包涵体后,利用透析与凝胶过滤层析技术相结合对rCE18进行复性和纯化。同时,采用GST-FF亲和柱层析及SDS-PAGE胶回收蛋白两种方法纯化rCE18,比较三者的纯化效果。并通过间接ELISA检测复性蛋白的生物学活性。结果表明:经透析与凝胶层析复性纯化后的rCE18蛋白的纯度可达到60%以上,活性回收率为41.3%,间接ELISA证实,复性后的rCE18蛋白能特异性识别猪囊虫...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所