基于TLR4MyD88信号通路观察粪菌移植对DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎干预作用机制

作者：陈梦; 马红梅^*; 曾文莉; 方婷; 阮雷

来源：现代生物医学进展, 2020, 20(24): 4606-4611.

DOI：10.13241/j.cnki.pmb.2020.24.002

• 溃疡性结肠炎
• TLR4/MyD88信号通路
• NF-κB
• 细胞因子

目的:探讨粪菌移植(fecal microbiota transplantation,FMT)对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate, DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)干预作用及其炎症相关的分子机制。方法:30只昆明小鼠采用DSS喂养建立结肠炎小鼠模型并随机分为模型组、FMT低剂量组和FMT高剂量组,另取10只作为对照组。FMT低剂量组、FMT高剂量组自造模后第1 d开始分别给予8 g/kg、15 g/kg粪菌剂量灌肠处理,灌肠体积0.2 m L。对照组和模型组给予等体积生理盐水灌肠处理。分别在实验第1、7、14及21 d称量小鼠体重。实验结束后处死小鼠,取出结直肠,观察各组小鼠结直肠形态变化并通过HE染色观察病变程度。ELISA检测小鼠结直肠组织匀浆液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin 6, IL-6)、白细胞介素-4(interleukin 4, IL-4)和白细胞介素-10(interleukin 10, IL-10)的表达变化;免疫组化法和RT-qPCR分别检测结直肠组织中核因子κB-P65亚基(nuclear factor-κB P65, NF-κB P65)蛋白和m RNA的表达情况;Western blotting检测结直肠组织中Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,My D88)的蛋白表达情况。结果:对照组相比,造模小鼠在第6 d起至第14 d体重明显减轻,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,FMT低、高剂量组小鼠第10 d起至第14 d体重明显减轻,FMT高剂量组小鼠体重升高更加明显,差异具有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,模型组小鼠结直肠组织中TNF-α、IL-6、NF-κB P65 m RNA和蛋白阳性表达、TLR4、My D88蛋白表达均显著升高(P<0.05),IL-4、IL-10表达显著下降(P<0.05);FMT高剂量组IL-4、IL-10较模型组显著升高,其余指标均显著下降(P<0.05)。结论:FMT可通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路缓解炎症反应,发挥对UC的治疗作用。

• 单位
  武汉大学人民医院