外周血单核细胞在角膜上皮重建的体外研究

作者：王萍; 梁丽影; 夏婵; 张弛^*

来源：国际医药卫生导报, 2022, 28(16).

• 外周血单核细胞
• 诱导分化
• 角膜上皮细胞
• 共培养系统

目的探讨外周血单核细胞作为角膜缘干细胞替代角膜上皮细胞再生的潜能。方法实验时间为2020年1月至2021年1月, 实验动物为来自暨南大学生理实验室5～8月龄健康新西兰大白兔30只;外周血单核细胞体外培养及鉴定:采用密度梯度离心法分离兔外周血单核细胞, 在倒置相差显微镜下观察单核细胞形态, 细胞分选技术检测单核细胞表面标志物CD14。将收集的单核迁移细胞置于新鲜角膜缘和角膜上皮组织块的微环境中共培养1周, 流式细胞仪检测诱导前与诱导后细胞表面特异标志物细胞角蛋白的阳性率, 诱导前与诱导后细胞表面角蛋白阳性表达率指数的组间比较采用重复测量设计的方差分析。计量资料采用t检验。结果流式细胞术检测诱导前单核迁移细胞特异标志物细胞角蛋白阳性率为1.64%, 诱导后单核迁移细胞特异标志物细胞角蛋白阳性率为11.30%。诱导前, 实验组细胞角蛋白阳性表达率与对照组比较, 差异无统计学意义(P>0.05);诱导7 d后, 实验组细胞角蛋白阳性表达率为(10.298±0.996)%, 与对照组(1.786±0.237)%比较, 差异有统计学意义(P<0.05);实验组诱导前细胞角蛋白阳性表达率为(1.308±0.376)%, 与诱导7 d后(10.298±0.996)%比较, 差异有统计学意义(P<0.05);对照组诱导前细胞角蛋白阳性表达率与诱导7 d后比较, 差异无统计学意义(P>0.05)。结论外周血单核细胞作为角膜缘干细胞的自体替代干细胞来源, 被认为是角膜上皮重建的有效治疗策略。