小鼠肝实质细胞的分离、鉴定及原代培养

作者：陈阳洁; 高柯欣; 王智豪; 李峰; 张琳琳; 刘娇; 陈晓光^*

来源：畜牧与饲料科学, 2019, 40(04): 7-11.

DOI：10.16003/j.cnki.issn1672-5190.2019.04.002

• 小鼠
• 肝实质细胞分离
• 原代培养
• 细胞鉴定

为分离、培养高纯度原代小鼠肝实质细胞,并鉴定其纯度及生物活性,试验采用原位两步循环灌流法及多次低速差速离心法分离纯化肝实质细胞,促贴壁培养基原代培养,台盼蓝检测其存活率,PAS反应检测其糖原合成能力,免疫荧光化学检测细胞中CK18表达情况。结果表明:每只小鼠可获取约1.5×106个细胞,存活率>97%;镜下发现细胞在接种后6 h开始贴壁,72 h贴壁细胞生长状态良好,胞体变大、不规则,细胞间相互靠拢呈岛状或条索状连接;肝细胞出现成片紫红色糖原颗粒,CK18在细胞中均匀分布;糖原反应联合CK18免疫荧光显示细胞纯度在90%以上。说明该试验所用方法分离出肝实质细胞数量和存活率高,促贴壁培养基培养的肝实质细胞纯度高,为细胞代谢、细胞毒性等的研究奠定了基础。

• 单位
  河南科技大学; 动物科技学院