Hsp90抑制剂减弱肝癌耐药细胞株对索拉非尼诱导铁死亡的耐受性

作者：林智才; 陈燕丽; 苏小清; 刘俊; 许丽贞^*

来源：现代肿瘤医学, 2022, 30(21): 3862-3868.

• Hsp90
• 索拉非尼
• 活性氧
• 铁死亡

目的:检测热休克蛋白90(heat shock protein 90,Hsp90)抑制剂协同索拉非尼(Sorafenib)对肝癌耐药细胞的作用机制，并研究其对Sorafenib诱导肝癌耐药细胞铁死亡的增敏效应。方法:MTT法检测格尔德霉素(Geldanamycin)联用Sorafenib在抑制HepG2/Sorafenib细胞增殖中的联合效应；流式细胞术检测HepG2/Sorafenib及HepG2细胞株在Sorafenib作用下，细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平的变化，以及Geldanamycin对细胞内ROS的协同诱导效应；FerroOrange染色法检测HepG2/Sorafenib及HepG2细胞株在Sorafenib作用下，细胞内二价铁离子水平变化；RT-PCR及Western blot实验检测Geldanamycin对铁死亡相关基因SLC7A11及GPX4等转录和表达的调节作用。结果:Geldanamycin可增强HepG2/Sorafenib耐药细胞株对Sorafenib的敏感性，经30 nmol/L浓度的Geldanamycin预处理后，Sorafenib的半数抑制率IC50由原来的(2.6±0.1)×103 nmol/L降为(37.2±6.9) nmol/L,变化差异显著(P<0.01)。当Sorafenib浓度高于32 nmol/L后，二者的联用指数CI小于0.2,表明Geldanamycin与Sorafenib联用处理HepG2/Sorafenib耐药细胞株具有强烈的协同效应；HepG2/Sorafenib耐药细胞株经30 nmol/L Geldanamycin预处理后，其细胞内的ROS水平可重新被Sorafenib诱导，相同浓度下与无Geldanamycin处理组比较，增强了4.2倍(P<0.01);30 nmol/L Geldanamycin可显著增强Sorafenib诱导HepG2/Sorafenib细胞内二价铁离子水平提高，提示其协同Sorafenib促细胞铁死亡作用；Geldanamycin能通过Akt-Nrf2途径下调SLC7A11蛋白的转录，并影响GPX4蛋白的表达。结论：抑制Hsp90能减弱肝癌耐药细胞株对Sorafenib诱导铁死亡的耐受性，其机制可能是通过阻断Akt/Nrf2介导的SLC7A11转录下调实现的。

• 单位
  厦门大学附属成功医院