哈巴俄苷通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路减轻神经炎症诱导的神经元损伤

作者：郝任娟; 胡颖超; 于顾然; 秦秀德; 陆韵薇

来源：中草药, 2023, 54(13): 4202-4213.

DOI：10.7501/j.issn.0253-2670.2023.13.013

• 哈巴俄苷
• 血管紧张素II
• 神经炎症
• 凋亡
• 共培养

目的 研究哈巴俄苷对神经炎症诱导神经元损伤的作用。方法 采用MTT检测血管紧张素II(angiotensin II,Ang II)和哈巴俄苷对小鼠小胶质BV2细胞活性的影响；观察BV2细胞的形态变化；检测细胞上清液中炎症因子水平；采用免疫荧光检测核因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)核易位以及CD86、髓系细胞触发受体2(triggering receptor expressed on myeloid cells 2,TREM2)的表达；采用Western blotting检测Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(molecule myeloid differentiation factor 88,MyD88)、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)蛋白表达。分别使用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）和TLR4抑制剂（TAK-242）进一步验证哈巴俄苷的作用机制。建立BV2-HT22细胞共培养模型，检测线粒体膜电位、细胞凋亡情况以及凋亡相关蛋白表达，研究哈巴俄苷对神经炎症引起的神经元损伤的影响。结果 Ang II显著上调BV2细胞TLR4、My D88、IL-1β、TNF-α和iNOS蛋白表达（P<0.01、0.001），促进NF-κB p65入核（P<0.001），调节小胶质细胞表面炎症标志物CD86和TREM2的表达（P<0.05）。哈巴俄苷和TAK-242可逆转Ang II或LPS诱导的BV2细胞的作用（P<0.05、0.01、0.001）。此外，哈巴俄苷可显著下调BV2-HT22共培养模型HT22细胞中凋亡相关蛋白的表达（P<0.01、0.001），抑制HT22细胞凋亡（P<0.05、0.001）。结论 哈巴俄苷可能通过抑制Ang II诱导的BV2细胞TLR4/MyD88/NF-κB通路的激活来减轻炎症反应，进而缓解炎症引起的神经元细胞的凋亡。

• 单位
  南京中医药大学; 广东省中医院; 深圳市中医院