一个抗旱/抗寒基因过表达载体构建及转基因植株的筛选鉴定

作者:韩娇; 阳立波; 樊婷婷; 江海坤; 张其安; 方凌; 任永兵; 马文佳; 曹树青
来源:安徽农业科学, 2015, 43(13): 48-50.
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2015.13.153

摘要

[目的]进一步研究LWT1基因在调控低温和干旱应答中的功能,构建拟南芥LWT1基因过表达载体,获得相应的转基因株系。[方法]以野生型拟南芥的c DNA为模板,利用PCR扩增LWT1基因全长,将该基因连接到p ART27载体上。将获得的重组载体转化至农杆菌菌株GV3101,通过浸花转化法将LWT1重组载体转化到拟南芥野生型植株中,利用转基因筛选与遗传鉴定获得LWT1转基因阳性植株。[结果]LWT1基因CDS全长990 bp,PCR电泳结果一致,测序比对结果正确。通过抗性筛选和分子鉴定获得转基因植株。[结论]LWT1过表达载体构建成功并获得相应的转基因株系,为进一步研究该基因的分子机制奠定基础。

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