摘要
目的研究不同浓度荜拔酰胺对肺癌细胞生长抑制作用,并进一步研究荜拔酰胺通过升高活性氧(ROS)诱导肺癌NCIH460细胞凋亡和焦亡的影响,阐明其抗肿瘤机制。方法常规培养肺癌NCI-H460细胞,设置对照组和不同浓度的荜拔酰胺处理组,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测NCI-H460细胞的抑制活性,细胞集落法检测荜拔酰胺对NCI-H460细胞集落形成的影响,流式细胞术分别检测荜拔酰胺对NCI-H460细胞凋亡影响和细胞内ROS含量变化对NCI-H460细胞生长抑制情况的影响,Western blotting法检测荜拔酰胺作用NCI-H460细胞对Bcl-2,Bax和caspase-3蛋白的影响,显微成像初步验证荜拔酰胺通过升高ROS对NCI-H460细胞焦亡的影响,同时通过Western blotting法检测ROS对焦亡相关蛋白Gasdermin E (GSDME)的影响。结果荜拔酰胺呈浓度依赖抑制NCI-H460肺癌细胞生长,对细胞的IC50值13. 1μmol·L-1。荜拔酰胺呈浓度依赖性抑制NCI-H460细胞集落形成及促进细胞凋亡。荜拔酰胺呈浓度依赖性地促进促凋亡蛋白Bax和Cle-caspase-3的表达,及抑制抑凋亡蛋白Bcl-2的表达。荜拔酰胺升高NCI-H460细胞内ROS的含量并诱导细胞凋亡和焦亡,同时ROS诱导GSDME-N蛋白表达。结论荜拔酰胺能够抑制肺癌细胞生长,升高NCI-H460细胞的ROS含量诱导细胞凋亡和焦亡。
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单位杭州市第一人民医院; 浙江大学