β-catenin和突变体ΔN90腺病毒载体的构建及其在MSCs中的表达

作者：崔恒进; 王春燕; 胡君; 谢桂琴; 徐晓静; 张焕相

来源：生物技术通报, 2013, (11): 153-158.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2013.11.020

• 腺病毒载体
• β-catenin
• ΔN90
• 骨髓间充质干细胞
• 构建 Adenovirus vector
• β-catenin
• ΔN90
• MSCs
• Construction

旨在研究β-catenin对MSCs迁移的作用,构建β-catenin和突变体ΔN90的重组腺病毒载体,在MSCs中验证其表达情况。将目的基因定向克隆到pAdTrack-CMV穿梭载体上,并经PmeⅠ线性化后在BJ5183细菌中与pAdEasy-1骨架质粒同源重组,获得重组腺病毒载体,在QBI-293A细胞中包装和扩增。结果显示,酶切和测序证实Ad-β-catenin和Ad-ΔN90质粒构建正确,荧光显微镜可观察到GFP的表达,并选出150 MOI为最适感染MSCs的感染复数,Western blot检测到Ad-β-catenin和Ad-ΔN90都能增加β-catenin的蛋白表达量,TOPF...

• 单位
  苏州大学