摘要
目的 依据病原微生物菌(毒)种国家标准菌株评价技术标准(WS/T 812—2022)建立大环内酯类抗生素耐药肺炎支原体(Mp)标准菌株,加速我国Mp相关研究进展,推进国家病原微生物资源保藏体系建设。方法 通过对菌株进行16S rDNA测序及特异性基因PCR鉴定,确定菌株为Mp菌株。通过对标准菌株菌落形态观测、基因分型、活性测定、最低抑菌浓度(MIC)值测定、耐药基因检测等明确其生物学特征,并进行菌株稳定性和活性评价。结果 标准菌株经16S rDNA测序及特异性基因PCR鉴定为Mp菌种,其连续传代后菌落形态及各种分子生物学特征稳定。标准菌株对红霉素、克拉霉素和阿奇霉素体外MIC值范围分别为≥256μg/mL、128μg/mL~≥256μg/mL和8μg/mL~32μg/mL,在基因水平上表现为23S rDNA基因A2063G突变。标准菌株在-80℃条件下可稳定保存12个月,解冻后需尽快进行增菌培养,避免4℃或者室温保存,标准菌株使用时避免超过两次冻融。结论 本研究建立并评价了大环内酯类抗生素耐药Mp标准菌株(CHPC 1.139 07),为Mp疾病防控、科研以及药物和疫苗的研发等工作提供标准菌株。
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单位中国医科大学; 公共卫生学院; 传染病预防控制国家重点实验室; 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所