结核分枝杆菌甲硫氨酰tRNA合成酶的结晶方法

作者：王炜; 蒋雪松; 张岱; 吕莹

来源：广东药学院学报, 2022, 38(03): 114-119.

DOI：10.16809/j.cnki.2096-3653.2022010201

• 结核分枝杆菌
• 甲硫氨酰tRNA合成酶
• 晶体

目的 制备结核分枝杆菌甲硫氨酰tRNA合成酶（Mt MetRS）晶体。方法 设计不同的重组Mt MetRS蛋白，使用大肠杆菌表达重组蛋白。坐滴气相扩散法在293 K温度下筛选不同重组蛋白的结晶条件，并使用悬滴法进行晶体优化。优化的晶体经液氮速冻保存。在上海同步辐射光源进行晶体衍射数据采集。结果 使用不同设计的重组蛋白进行结晶筛选和优化，最终获得了可以进行晶体衍射的高分辨率蛋白质晶体。并确定6×His序列在Mt MetRS分子的结晶中起到关键作用。结论 Mt MetRS分子两端的6×His序列是帮助Mt MetRS分子结晶的重要因素。

• 单位
  河南中医药大学; 中国医学科学院病原生物学研究所; 第一附属医院检验科