非洲猪瘟病毒p30单克隆抗体的制备和鉴定

作者：杨莎莎; 苗雨润; 薄宗义; 王振忠; 谭凯; 鲍晨沂; 吴晓东^*; 陈鸿军; 郑龙三; 钱莺娟^*; 戴建君

来源：中国兽医科学, 2020, 50(08): 976-981.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0117

• 非洲猪瘟病毒
• p30蛋白
• 单克隆抗体

p30蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)的膜蛋白,在病毒感染早期分泌表达,含量丰富且抗原性较高,是重要的病毒早期诊断靶标。本研究以ASFV基因Ⅱ型格鲁吉亚2007株p30基因的质粒为模板扩增p30基因片段,连接至原核表达载体pET-28a,转化到大肠杆菌Rosetta后,经IPTG诱导表达和镍柱纯化;将纯化后的重组p30蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合和间接ELISA方法,筛选出了2株能够稳定分泌抗p30蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,并通过制备腹水的方法获得单克隆抗体;最后经Western-blot和IFA试验鉴定,其均能与ASFV感染细胞发生特异性反应。本研究为ASFV感染的诊断和致病机制研究提供了重要材料。

• 单位
  中国动物卫生与流行病学中心; 农业部; 中国农业科学院上海兽医研究所