摘要
目的观察转录共激活子p300和蛋白激酶C(PKC)β2在高糖及甲基乙二醛糖化终产物(AGEs)诱导人系膜细胞(HMCs)活性氧(ROS)产生和纤维连接蛋白(FN)蛋白表达中的作用及相互关系。方法将培养的HMCs分为以下几组:①正糖组(NG)、高糖组(HG)、渗透压组(LG)、正糖+血清白蛋白组(BSA)、正糖+糖化终产物组(AGEs);②高糖+空载体组(HN)、高糖+PKCβ2转染组(PO)、高糖+PKCβ2抑制剂CGP53353组(PI)、糖化终产物+空载体组(AN)、糖化终产物+PKCβ2转染组(APO)、糖化终产物+PKCβ2抑制剂CGP53353组(API);③正糖+p300抑制剂组(NG+Gar)、高糖+p300抑制剂组(HG+Gar)、血清白蛋白+p300抑制剂组(BSA+Gar)、糖化终产物+p300抑制剂组(AGEs+Gar),以上各组细胞均培养2 d。荧光显微镜及荧光酶标仪检测细胞内ROS水平;Western blot法检测各组细胞p300、PKCβ2及FN蛋白表达。结果 HG组及AGEs组p300、PKCβ2蛋白表达及ROS水平增加,分别较NG组及BSA组增加了1.04倍、1.26倍、0.78倍和1.45倍、1.07倍、0.71倍(P<0.05)。同HG组及AGEs组相比,HG+Gar组及AGEs+Gar组ROS水平显著降低,分别为HG组及AGEs组的43%和39%(P<0.05)。PO组及APO组分别较HG组和AGEs组p300、PKCβ2蛋白表达进一步上调,分别为HG组及AGEs组的1.19倍、1.73倍和1.23倍、1.69倍(P<0.05);PI组和API组p300、PKCβ2蛋白表达显著下调(P<0.05);HN组和AN组p300、PKCβ2蛋白表达分别较HG组及AGEs组差异无统计学意义;HG+Gar组及AGEs+Gar组p300、FN蛋白表达显著下降,分别为HG组及AGEs组的31%、43%和37%、29%(P<0.05)。结论高糖及MGO-糖化终产物通过诱导HMCs转录共激活子p300激活参与系膜细胞氧化应激水平上调及FN蛋白表达。
-
单位重庆医科大学附属第一医院