摘要
目的:探索黄芪与灯盏细辛中有效成分黄芪甲苷、绿原酸、灯盏乙素最佳配比组合及其对缺糖缺氧PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用PC12细胞株、无糖DMEM培养基和氯化钴构建慢性脑缺血细胞模型。采用均匀设计法筛选黄芪甲苷、绿原酸、灯盏乙素最优配比组合,并采用流式细胞术检测活性氧(ROS)含量,罗丹明123检测线粒体膜电位,WB技术检测Nrf2、HO-1蛋白表达,评价最优组合的作用机制。结果:0.4 mmol/L的氯化钴为PC12缺糖缺氧造模条件。3个单体最优组合为黄芪甲苷∶绿原酸∶灯盏乙素=10∶75∶40时显著提高PC12细胞存活率(P<0.01);与模型对照组比,最优组合的活性氧含量显著降低(P<0.01),线粒体膜电位显著升高(P<0.01),Nrf2和HO-1蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论:黄芪甲苷∶绿原酸∶灯盏乙素=10∶75∶40是最优组合,该组合通过降低细胞内活性氧含量并稳定线粒体膜电位促进缺血缺氧PC12细胞存活,上调Nrf2、HO-1蛋白表达,对慢性脑缺血性氧化损伤产生保护作用。
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