摘要
目的探讨成人骨髓间质干细胞(hMSC)向神经元样细胞分化过程中分化与细胞分裂的关系.方法从成人骨髓中分离骨髓间质干细胞(MSC),培养扩增.用参芪液诱导MSC分化为神经元样细胞,经免疫组化鉴定其神经元烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.诱导后进行神经元样细胞计数,掺入Brdu测定,计算标记系数.采用双标记间接免疫荧光法检测神经元样细胞特异性表面标记(NSE、NF)与细胞分裂的标记Brdu的关系.抑制DNA合成,计算Brdu、NSE和NF阳性细胞数.结果MSC经参芪液诱导后,可见神经元样细胞.免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF阳性,GFAP阴性.MSC诱导分化后的细胞总数增加,诱导分化后12 h内细胞增殖较快.30%以上分化的神经元样细胞在表达NSE和NF的同时可见Brdu标记,而另一部分分化的神经元则无Brdu标记.抑制DNA合成,并不会阻止神经元的分化,仍有70%的分化神经元表达神经元特异性标记蛋白NSE.结论MSC诱导分化的部分神经元样细胞可进行细胞分裂,但抑制细胞分裂不影响神经元分化.
- 单位