抗SARS-CoV-2 S蛋白IgM单克隆抗体的表达及鉴定

作者：张瑞雪; 殷强玲; 黄涛; 钱振; 芜为; 王世文; 梁米芳; 孙丽娜^*; 王晓芳^*

来源：病毒学报, 2023, 39(02): 305-312.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004291

• SARS-CoV-2
• IgM单克隆抗体
• J链
• 重组蛋白

为了寻求SARS-CoV-2 IgM抗体阳性血清质控品的替代品，本研究成功表达纯化出抗SARS-CoV-2 S蛋白IgM单克隆抗体。研究确定了IgM单克隆抗体最佳表达载体为含增强子sp163和信号肽2的组合以及第5d为目的蛋白收获的最佳时间。此外在研究J链的作用时发现转染细胞时不添加J链（nCoV-163-IgM3）的表达量明显高于添加J链（nCoV-163-IgM3 J）时的表达量，J链对蛋白稳定性也无明显影响，且nCoV-163-IgM3和nCoV-163-IgM3 J抗原结合活性之间的差别无统计学意义（P>0.05）,nCoV-163-IgM3和nCoV-163-IgM3 J对本研究所检测的WTS1、Alpha-S1、Beta-S1、Delta-S1、Omicron-S1、BA.2-S1、BF.7-RBD、XBB.1-S1、BQ1.1-S1等九种抗原均有结合活性，只有一株（BA.2.75-RBD）逃逸。纯化后的目的蛋白经还原剂（β-ME）还原后显示重链分子量大小为70kD左右，轻链分子量大小为25kD左右。目的蛋白均可与新型冠状病毒抗体检测试剂盒（胶体金，INNOVITA）、SARS-CoV-2 S蛋白IgM抗体酶联免疫吸附测定试剂盒（Elabscience）、抗SARS-CoV-2 S-RBD蛋白人IgM抗体酶联免疫吸附测定试剂盒（Proteintech）等三种试剂盒反应。

• 单位
  湖北省疾病预防控制中心; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所; 安徽医科大学; 基础医学院