猪链球菌2型05ZYH33菌株启动子的筛选和鉴定

作者：刘冉; 黄萌萌; 陈平; 朱金鲁; 谢芳; 刘思国^*; 张跃灵^*

来源：中国预防兽医学报, 2019, 41(06): 584-589.

• 猪链球菌
• 强启动子
• 筛选和鉴定
• 翻译延伸因子EF-Tu
• 烯醇化酶

为了筛选和鉴定用于猪链球菌(S.suis)致病因子和致病机制研究的启动子,本研究通过质谱鉴定了来自S.suis 2型05ZYH33菌株的5个高丰度蛋白质,并通过其驱动GFP蛋白和甘露糖苷酶SSU051921的表达水平,评估了这5个蛋白相应的基因启动子的强弱。结果显示,这5种蛋白质分别为SSU050177、SSU050530、SSU051503、SSU051815和SSU051868,相应的5个启动子P0177、P0530、P1503、P1815和P1868均能够有效驱动GFP在E.coli和S.suis中的高水平表达,但是P1815、P0177和P1868不能驱动SSU051921在S.suis中的表达。P0530和P1503能够驱动SSU051921在S.suis中的表达,并且P1503启动子驱动GFP和SSU051921的表达水平均比P0530启动子驱动的高两倍以上。因此,P0530和P1503是S.suis的强启动子,并且P1503更强于P0530。这在高水平表达GFP用于标记菌体,以及构建无启动子基因的回复突变菌株中发挥关键作用,在S.suis遗传操作中具有很好的应用前景。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所