青鱼Dazl基因的原核表达及其多克隆抗体制备

作者：王艺舟; 潘启华; 王乾; 夏必琳; 罗君志; 方健; 邓羽; 廖明聪; 陈天圣

来源：淡水渔业, 2019, (03): 27-31.

DOI：10.13721/j.cnki.dsyy.2019.03.005

• 青鱼(Mylopharyngodon piceus)
• Dazl
• 原核表达
• 多克隆抗体 Mylopharyngodon piceus
• prokaryotic expression
• polyclonal antibody

实验进行了青鱼(Mylopharyngodon piceus)Dazl基因的原核表达,兔抗青鱼源Dazl多克隆抗体的制备及抗体的特异性验证。首先将青鱼Dazl基因的编码区利用重组表达引物从pCS2-MpDazl质粒中扩增出来,经酶切后连接到pET-28a载体中,构建pET-28a-MpDazl重组表达载体。然后将pET-28a-MpDazl重组质粒转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中,利用异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得分子量为27 kD的Dazl重组蛋白。将纯化的Dazl重组蛋白作为抗原免疫家兔制备多克隆抗体,抗体的效价和特异性通过ELISA法和...

• 单位
  农业部