白纹伊蚊实验室抗溴氰菊酯品系筛选及其形态变化和钠通道基因分析

作者：蔡微; 徐昕; 杨永红; 郑学礼^*

来源：热带医学杂志, 2020, 20(02): 180-279.

• 白纹伊蚊
• 溴氰菊酯
• 实验室抗性筛选
• Kdr基因

目的揭示实验室内白纹伊蚊溴氰菊酯抗性汰选中蚊抗性发展趋势、形态表型和蚊击倒抗性相关钠离子通道(VGSC)结构域Ⅲ基因片段(Kdr)的变化。方法实验室严格控制饲养条件,用溴氰菊酯汰选白纹伊蚊至30代,计算幼虫半数致死浓度(LC50)并获得抗性倍数(RR),成蚊接触筒法计算成蚊死亡率。随机选取汰选白纹伊蚊抗性株及敏感株的雌蚊,测量成蚊的体长等8个形态学指标,并对所测形态指标数据进行统计分析。PCR扩增抗性株及敏感株雌蚊钠通道结构域Ⅲ基因片段,TA克隆,测序,进行序列分析。结果经过汰选,抗性株的LC50由0.020 mg/L变成0.048 mg/L,其抗性倍数为2.4倍。幼虫生物测量结果显示抗性株具有低度抗性,成蚊抗药性生物测试表明R-20代白纹伊蚊为抗性群体,且抗性级别为R。18代白纹伊蚊抗溴氰菊酯株(R)与敏感株(S)的体长、前腿长、中腿长、后腿长、翅长、翅宽、触角长和喙长均数差异有统计学意义(P<0.05)。随着代数的增加,白纹伊蚊抗性株在形态学各方面指标的均数呈现降低的趋势。测序显示,Kdr第96、132、204个位点碱基敏感株为C,而抗性株则突变为T;第111位敏感株碱基为A,抗性株则为G;第534位抗性株碱基由T突变为C。然而,敏感株及抗性株均未发现上述位点的氨基酸序列突变,未影响其蛋白质的表达。结论实验室内采用溴氰菊酯抗性汰选抗性白纹伊蚊模型成功。溴氰菊酯汰选抗性白纹伊蚊形态表型发生变化,溴氰菊酯汰选抗性白纹伊蚊的19代、20代蚊Kdr基因一些位点发生碱基突变,但对应的氨基酸序列没有改变。

• 单位
  南方医科大学; 公共卫生学院