摘要
为了研究膝关节炎滑膜液中外泌体(Exosomes)对软骨的作用,并探讨其通过何种信号通路发挥作用,本研究通过ExoQuick提取滑膜液中Exosomes并用电镜、Nanosight、Western blotting进行鉴定;采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测软骨组织细胞活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测采用上清液中MMP-1、MMP-13浓度;Western blotting检测蛋白磷酸化水平;实时荧光定量PCR方法检测下游基因表达水平。研究结果显示成功提取大小在100 nm以下Exosomes颗粒。关节炎滑膜液来源Exosomes与空白对照及正常Exosomes相比较,能够明显促进软骨细胞的增殖,降低MMP-1、MMP-13水平。检测YAP蛋白发生明显磷酸化,与对照组比较有明显差异,YAP下游基因CTGF、Cyr61、ANKRD1均明显高表达。膝关节炎滑膜液分泌的Exosomes能够通过YAP的去磷酸化,抑制MMP-1、MMP-13的分泌,促进软骨细胞的增殖,具有保护关节软骨的作用。
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