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摘要
目的研究在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者中,microRNA-325-3p(miR-325-3p)是否参与反复自然流产的发生和发展,以及在其中的作用机制。方法选取2015年1月至2019年6月在唐山市妇幼保健院就诊的89例IVF-ET反复自然流产患者和202例正常妊娠行人工流产患者作为研究对象。获取其妊娠4～12周的流产组织。通过原位杂交及实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)比较IVF-ET反复自然流产患者组织与正常人工流产患者组织中miR-325-3p表达差异;通过生物信息学网站预测miR-325-3p的可能靶基因,采用免疫印迹(Western blot)、qRT-PCR技术在细胞及组织水平对其进行验证,探究两者在IVF-ET反复自然流产患者中的作用机制。结果原位杂交显示,IVF-ET反复自然流产患者组织均表达miR-325-3p强信号,而正常人工流产患者组织仅存在miR-325-3p弱表达(P<0.01),qRT-PCR进一步证实该结果。Western blot、qRT-PCR检测miR-325-3p模拟物、抑制物转染的细胞,证实叉头框转录因子p3(Foxp3)为miR-325-3p的靶基因之一,且Foxp3蛋白及mRNA水平的表达量被miR-325-3p模拟物显著降调,被抑制物显著上调。与正常人工流产患者组织比较,IVF-ET反复自然流产患者组织Foxp3蛋白及mRNA表达均显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MiR-325-3p的其中一个靶基因是Foxp3,通过miR-325-3p增高进而降调Foxp3的表达,来实现免疫耐受降低,可能是IVF-ET患者发生反复自然流产的机制之一。
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单位唐山市妇幼保健院
