鸡法氏囊B淋巴细胞cDNA酵母表达文库的构建与鉴定

作者：陈玉明; 高玉龙; 张礼洲; 王念; 高立; 任宪刚; 姜莉莉; 高宏雷; 秦立廷; 王永强; 祁小乐; 王笑梅

来源：黑龙江畜牧兽医, 2014, (19): 15-17+21.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2014.1099

• 法氏囊
• B淋巴细胞
• 酵母双杂交
• cDNA文库 bursa of Fabricius
• B lymphocyte
• yeast two-hybrid
• cDNA library

为了研究传染性法氏囊病病毒(IBDV)与宿主B淋巴细胞作用机制,构建鸡法氏囊B淋巴细胞酵母表达文库,试验从3周龄SPF鸡中摘取法氏囊,分离制备B淋巴细胞,从中提取细胞总RNA,使用SMART和LD-PCR技术合成双链cDNA,并进一步与线性化载体pGADT7-Rec共同转化Y187酵母感受态细胞,通过同源重组构建酵母表达文库。结果表明:所构建cDNA文库的效价为9.5×107cfu/mL,重组率为100%,可以用于酵母双杂交试验。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室