以氘代利伐沙班为内标物的UHPLC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中利伐沙班及其药动学研究

作者：杜加秋; 董福霞; 蔡邱华

来源：中国现代应用药学, 2020, 37(15): 1867-1871.

DOI：10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2020.15.012

• UHPLC-MS/MS
• 利伐沙班
• 血药浓度
• 药动学
• Beagle犬

目的建立测定Beagle犬血浆中利伐沙班浓度的UHPLC-MS/MS法。方法以甲基叔丁基醚-二氯甲烷(2∶1)沉淀蛋白处理血浆样品,氘代利伐沙班(利伐沙班-d4)为内标,采用Thermo BDS Hypersil C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.4μm);流动相:A相为甲醇溶液(含0.015mol·L-1甲酸铵和0.1%甲酸);B相为水-甲醇(90∶10)溶液(含0.015mol·L-1甲酸铵和0.1%甲酸),梯度洗脱。质谱条件为电喷雾离子源,正离子模式检测,扫描方式为多反应离子监测。用于定量检测的离子反应分别为[M+H]+m/z 436@30 eV→m/z 144.900(利伐沙班)和[M+H]+m/z 440@24 eV→m/z 144.900(利伐沙班-d4)。结果血浆利伐沙班浓度在0.5～400ng·mL-1内线性关系良好(r=0.9961),定量下限为0.5ng·mL-1,批内、批间精密度均<13%,提取回收率89.4%～96.5%,基质效应94.7%～97.2%。血浆样品冻存(-80℃)33d稳定性良好,反复冻融3次及提取后室温放置12 h条件下,样品浓度均无显著变化。将本法应用于Beagle犬口服给予利伐沙班片后的药动学考察,主要药动学参数如下:Tmax(2.11±1.133)h,Cmax(179.3±50.65)ng·mL-1, t1/2(10.05±4.34)h,AUC0-t(1 161.6±339.74)h·ng·mL-1。结论试验结果表明本法操作简单,灵敏度高,重复性良好,结果准确可靠,可用于测定Beagle犬血浆中利伐沙班浓度和其体内的药动学研究。