大黄素靶向Notch通路抗腹膜透析大鼠腹膜纤维化

作者：王慧超; 林旭红; 房晓鹏; 穆小云; 李铁军; 刘建林

来源：生理学报, 2016, 68(06): 747-756.

DOI：10.13294/j.aps.2016.0084

• 大黄素
• 腹膜透析
• 腹膜纤维化
• Notch

长期腹膜透析治疗经常并发腹膜纤维化,本文旨在探讨大黄素对腹膜透析相关性腹膜纤维化大鼠的治疗作用及其相关的细胞、分子机制。在体内实验中,以腹腔注射4.25%葡萄糖腹膜透析液(100 m L/kg)诱发大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化动物模型,于2周、4周、6周时进行模型大鼠腹膜平衡实验,并测量腹膜厚度、应用HE染色和Masson染色进行组织病理学评估,ELISA法测定血浆中III型前胶原氨基端肽(PIIINP)水平。选取6周模型大鼠,用大黄素腹腔注射进行治疗,观察治疗后上述指标的变化,同时以Real-time PCR方法检测大鼠腹膜Notch1、Jagged-1、Hes-1基因表达水平,Western blot方法检测大鼠腹膜组织Notch1、Jagged-1、Hes-1、Notch胞内结构域(Notch intracellular domain,NICD)蛋白表达。在体外实验中,培养大鼠腹膜间皮细胞,使其过表达或沉默Notch1,Western blot检测大黄素对腹膜间皮细胞Hes-1、Hey的诱导表达作用。HE染色显示:随着造模时间的延长,间皮细胞减少、部分脱落,间质有炎细胞浸润,6周时Masson染色显示模型组腹膜明显增厚(P<0.01),可见大量胶原沉积。与对照组相比,6周模型组大鼠血浆PIIINP水平显著升高(P<0.01)。与6周模型组相比,大黄素处理可增加模型大鼠腹膜组织中间皮细胞数量,抑制腹膜增厚(P<0.01),改善胶原沉积,降低血浆PIIINP水平(P<0.05),并在基因、蛋白水平下调Notch1、Jagged-1、Hes-1的表达(P<0.05或P<0.01),且下调NICD蛋白水平(P<0.01);体外实验显示:与正常细胞大黄素处理组相比,大黄素对过表达Notch1间皮细胞的Hes-1、Hey表达具有抑制作用(P<0.05),而对Notch1沉默间皮细胞的Hes-1、Hey表达无明显影响(P>0.05)。以上结果表明,在高浓度葡萄糖腹膜透析液所致的大鼠腹膜纤维化模型中有Notch通路的活化,大黄素可能通过抑制Notch通路改善腹膜纤维化程度。

• 单位
  河南大学淮河医院; 河南大学第一附属医院