一种GLP-1受体激动剂高通量筛选细胞模型

作者：王芮; 杨紫鑫; 柯志强^*; 成细瑶; 苏正定^*

来源：中国药理学通报, 2023, 39(09): 1793-1798.

• 2型糖尿病
• GLP-1
• GLP-1受体激动剂
• 小分子GLP-1受体激动剂
• cAMP响应元件
• 荧光素酶报告基因
• Z′因子

目的 构建GLP-1受体激动剂高通量筛选细胞模型。方法 构建pEGFP-GLP-1R-3C重组质粒，转染HEK293T细胞，用G418和流式细胞仪进行筛选。所构建的细胞系命名为HEK293T-GLP-1R-3C-eGFP细胞系。Western blot和激光共聚焦检测GLP-1R-3C-eGFP蛋白的表达。将环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)响应元件报告基因转染HEK293T-GLP-1R-3C-eGFP细胞，不同浓度的GLP-1刺激后，用一步法荧光素酶报告基因检测试剂盒检测发光值反映细胞cAMP水平，采用cAMP试剂盒(ELISA)进行验证。结果 成功构建HEK293T-GLP-1R-3C-eGFP细胞系。不同浓度GLP-1刺激后，发光值变化趋势与细胞cAMP水平变化趋势相似。本实验中Z′因子的值为0.52。结论 本研究建立了基于重组HEK293T细胞株，其可用于GLP-1受体激动剂高通量筛选。

• 单位
  湖北工业大学; 湖北科技学院; 广西大学