敲低肌切蛋白可抑制胃肠道间质瘤细胞的增殖能力

作者：刘军言; 刘佳佳; 吴益西; 陈骞; 林勇; 钱锋

来源：第三军医大学学报, 2016, 38(12): 1422-1426.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201602052

• 肌切蛋白
• 胃肠道间质瘤
• 增殖
• 伊马替尼

目的探讨肌切蛋白(scinderin,SCIN)对胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)细胞增殖能力的影响。方法用shRNA慢病毒干扰技术将SCIN在GIST细胞中稳定敲低,并通过Western blot和qRT-PCR检测敲低效率。通过CCK-8实验检测伊马替尼IC50和SCIN对GIST细胞增殖能力的影响,通过平板克隆形成实验检测SCIN对GIST细胞克隆形成能力的影响,通过裸鼠皮下成瘤实验检测SCIN对移植瘤生长的影响。实验按照对GIST细胞进行的不同处理分组:WT组(野生型组,未进行转染),Mock组(阴性对照组,转染阴性对照序列),sh SCIN 1组(转染SCIN干扰序列1),sh SCIN 2组(转染SCIN干扰序列2)。结果 sh SCIN 1组和sh SCIN 2组GIST细胞在增殖能力上明显低于Mock组,增殖能力在第27天均有明显差异(n=4,P<0.05)。移植瘤实验中sh SCIN 1组较Mock组的移植瘤质量显著降低:sh SCIN 1组vs Mock组=(0.175 0±0.045 6)g vs(0.334 1±0.016 5)g(n=4,P<0.01)。平板克隆形成实验显示sh SCIN 1组克隆形成数显著少于Mock组,分别为59.67±5.68和123.33±2.52(n=3,P<0.01)。在使用0.57μmol/L的伊马替尼处理WT组细胞1、3、5 d后,SCIN的表达随处理时间而降低。结论敲低SCIN可以抑制GIST细胞在体外和体内环境中的增殖能力,伊马替尼可以抑制GIST细胞中SCIN的表达,SCIN可能成为GIST的治疗靶点。

• 单位
  第三军医大学西南医院