鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株感染性分子克隆的构建

作者：包晓玮; 王笑梅; 高宏雷; 祁小乐; 付朝阳; 张厚双; 彭志伟

来源：中国预防兽医学报, 2006, (04): 369-374.

• 鸡传染性法氏囊病病毒
• Gx株全长cDNA
• 感染性分子克隆 infectious bursal disease virus
• full-length genomic cDNA clone of Gx strain
• infectious molecular clone

本研究以鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株(野毒株)基因组为模板,用蛋白酶K法提取病毒基因组核酸dsRNA,在cDNA克隆的5'端上游引入了T7启动子序列,采用Long-accurateRT-PCR(LA-PCR)一步法扩增并克隆了病毒基因组A节段与B节段全长cDNA。序列测定结果表明,基因组A节段全长共3267个核苷酸,包括5'及3'端的非编码区和两个部分重叠的开放阅读框,基因组B节段全长共2843个核苷酸,包括5'及3'端的非编码区和一个开放阅读框。将IBDV-Gx株的A节段全长基因组及B节段全长基因组分别克隆入pMD18-T载体,构建成pMD-A、pMD-B两个带有T7启动子的重组质粒。两个重...