摘要
为解决复杂发酵液背景下非目的代谢物干扰问题,建立一种适用于体外发酵条件下,黄豆苷元及其生物转化物雌马酚的高效液相色谱法分析方法。粪便菌群在脑心浸液肉汤培养基中转化黄豆苷元48 h,经乙酸乙酯提取,C18色谱柱(250mm×4.6 mm, 5μm)分离,流速为0.8 mL/min,柱温25℃,进样量20μL,以水-甲醇-乙腈(体积比5∶3∶2)为流动相,在230nm和260 nm双波长处检测。结果表明:方法快速、准确,在6.25~100μg/mL范围黄豆苷元和雌马酚的线性相关系数(R2)分别为0.9999和0.9996,平均回收率为92.12%~104.34%,相对标准偏差为0.15%~0.24%,检出限分别为0.07μg/mL和0.05μg/mL,定量限分别为0.23μg/mL和0.16μg/mL。本研究所建方法具有较高的精确度且方法简便,可应用于粪便菌群发酵液中黄豆苷元和雌马酚的定量检测。
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