卵巢上皮性癌SEREX抗原基因TM4SF1、C1D、TIZ原核表达载体的构建及表达

作者：阳志军; 李力; 蒋燕明; 张玮; 张洁清; 潘忠勉

来源：广西医科大学学报, 2009, (03): 362-365.

DOI：10.16190/j.cnki.45-1211/r.2009.03.054

• 卵巢上皮性癌
• SEREX,抗原基因
• 基因重组

目的:克隆并构建卵巢上皮性癌SEREX抗原基因:TM4SF1、C1D、TIZ的原核表达载体。方法:用PCR从含SEREX抗原基因序列的重组pBK-CMV质粒中扩增TM4SF1、C1D、TIZ的编码序列(coding sequence,CDS),双酶切后插入原核表达质粒pET-30b(+),经酶切及测序鉴定,阳性质粒转化表达菌BL21感受态细胞,用IPTG诱导表达目的蛋白,用SDS-PAGE分析表达产物。结果:成功扩增了TM4SF1、C1D、TIZ的CDS,并构建了原核表达质粒pET-30b(+)/TM4SF1、pET-30b(+)/C1D、pET-30b(+)/TIZ,经测序与Genbank中的相应序列一致。并在大肠杆菌BL21中成功诱导表达目的蛋白。结论:成功构建了原核表达质粒pET-30b(+)/TM4SF1、pET-30b(+)/C1D、pET-30b(+)/TIZ,并在大肠杆菌中表达了重组融合目的蛋白,为进一步研究奠定了基础。

• 单位
  广西医科大学附属肿瘤医院