摘要
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-15b在胰腺癌(PC)的表达及其对胰腺癌细胞株增殖、迁移、凋亡的影响。方法 实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-15b在4种购自中国科学院细胞库的胰腺癌细胞株[SW1990、人胰腺癌细胞株(CFPAC-1)、PANC-1、BxPC-3]和购自美国ATCC细胞库的人正常胰腺导管上皮细胞细胞株(HPDE6c7)的表达量。将稳定转染miR-15b短发卡RNA(shRNA)的CFPAC-1、PANC-1作为实验组,以转染阴性对照(NC)正常表达miR-15b的CFPAC-1、PANC-1作为对照组。转染后细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验检测CFPAC-1、PANC-1的增殖能力;Transwell迁移实验检测CFPAC-1、PANC-1的迁移能力;流式细胞术检测CFPAC-1、PANC-1的凋亡率。应用SPSS 19.0统计软件分析,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,多组资料间比较使用单因素方差分析和LSD-t检验,计数资料采用率值表示,组间比较采用χ2检验。结果 miR-15b在4株胰腺癌细胞株(SW1990、CFPAC-1、PANC-1、BxPC-3)的表达量(3.63±1.02、5.28±0.76、6.72±1.39、4.68±1.56)较HPDE6c7的表达量(1.08±0.23)明显增高,差异有统计学意义(t=9.944、10.326、12.013、15.877,P<0.01)。低表达miR-15b组的CFPAC-1在2、3、4 d细胞增殖能力shRNA(0.51±0.04、0.94±0.06、1.25±0.15)比对照组的CFPAC-1(0.68±0.06、1.21±0.09、1.95±0.12)显著下降,差异有统计学意义(t=8.256、6.350、7.002,P<0.05);低表达miR-15b组的PANC-1在2、3、4 d细胞增殖能力shRNA(0.48±0.05、0.76±0.13、1.44±0.25)比对照组的PANC-1(0.58±0.07、0.98±0.13、1.86±0.14)显著下降,差异有统计学意义(t=9.988、10.022、13.050,P<0.01)。低表达miR-15b组的CFPAC-1、PANC-1穿过Transwell小室的细胞数量[(38.47±4.69)个、(47.83±12.47)个]比对照组细胞数[(62.39±7.39)个、(68.97±8.44)个]明显减少,差异有统计学意义(t=5.798、8.465,P<0.05)。低表达miR-15b组CFPAC-1、PANC-1细胞凋亡率[(14.68±3.21)%、(11.57±2.52)%]较对照组细胞凋亡率[(4.29±1.42)%、(4.73±0.38)%]明显增高,差异有统计学意义(t=6.350、8.669,P<0.05)。结论 miR-15b在PC细胞中高表达,低表达miR-15b会降低PC细胞的增殖和迁移能力,促进PC细胞凋亡。
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单位郑州大学; 河南省人民医院