提高新生大鼠原代心肌细胞纯度方法的探讨

作者：王新陆; 崔琳; 王幼平; 李彬; 谢世阳; 朱明军

来源：世界科学技术-中医药现代化, 2015, 17(02): 333-337.

DOI：10.11842/wst.2015.02.007

• 新生大鼠
• 心肌细胞
• 原代培养
• 鉴定

目的:探讨提高新生大鼠原代心肌细胞纯度的方法。方法:应用0.08%心肌细胞消化液重复消化出生第1-3天乳鼠的心肌组织多次;收集的细胞用含10%胎牛血清的DMEM培养基中和。用差速贴壁分离法分离后,加入红细胞裂解液,以除去红细胞,加入溴脱氧尿嘧啶(Brdu)纯化心肌细胞后置CO2培养箱孵育2天,无血清同步化1天。结果:分离1只乳鼠获得的心肌细胞产量约为1.2×106个,有活力心肌细胞占90%以上,心肌细胞纯度>90%,3-4天后心肌细胞融合成片,并出现自发性节律性搏动。结论:该方法在保证心肌细胞产量和心肌细胞活性的同时,能大幅度提高心肌细胞纯度。

• 单位
  河南中医药大学; 河南中医学院第一附属医院