siRNA沉默EZH2对HL-60细胞迁移、增殖能力的影响及其机制

作者：朱秋花; 潘学谊; 曾文彬; 周兰兰; 关则兵^*

来源：重庆医学, 2021, 50(10): 1653-1662.

DOI：10.3969/j.issn.1671-8348.2021.10.007

• 急性早幼粒细胞白血病
• HL-60
• 人类同源基因2
• 细胞迁移
• 髓外浸润

目的探讨人类同源基因2(EZH2)对人急性早幼粒细胞白血病细胞系HL-60细胞迁移、增殖能力的影响及其机制。方法通过慢病毒转染技术用siRNAs沉默HL-60细胞的EZH2基因,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot验证3个不同序列的siRNA敲除EZH2的效果并筛选出最佳序列。随后用CCK-8和流式细胞术分别检测细胞增殖活性和凋亡,并用Transwell迁移小室试验检测细胞的迁移能力,用Western blot方法检测细胞迁移、增殖及凋亡相关蛋白的表达水平。结果在HL-60细胞中用siRNAs敲除EZH2后其增殖能力下降(P<0.05),凋亡增加(P<0.05)。Transwell迁移小室试验结果显示,HL-60细胞敲除EZH2组(siEZH2组)的下室细胞比例比HL-60野生株细胞组(wild组)和空病毒组(NC组)明显降低;苏木素染色后发现siEZH2组膜上细胞基数明显低于wild组和NC组。Western blot检测显示,siRNA沉默EZH2后细胞迁移相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达下调,E-钙黏蛋白(E-cadherin)上调,增殖及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)基因下调,而半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)上调。结论在HL-60细胞中敲除EZH2基因后其增殖、迁移能力下降,凋亡增加。

• 单位
  广东药科大学附属第一医院