人乳头瘤病毒6b亚型L1重组质粒的构建及免疫原性分析

作者：刘方; 王家璧; 左亚刚; 刘跃华; 马东来; 朱铁山

来源：临床皮肤科杂志, 2004, 33(02): 69-72.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4963.2004.02.002

• 尖锐湿疣
• 乳头瘤病毒,人
• 疫苗,DNA
• 真核表达

目的构建人乳头瘤病毒(HPV)6b亚型L1的重组质粒,并了解其对小鼠的免疫原性。方法将HPV6b的L1基因插入真核表达载体pcDNA3.1中,构建L1的重组质粒;鉴定后转染COS-7细胞,并用免疫印迹法进行表达分析;18只BALB/雌性小鼠用作重组质粒的免疫原性检测。结果重组质粒可被内切酶EcoRI和BamHI切开,测序发现插入片段与L1基因一致;转染24h后十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及免疫印迹出现了阳性条带;经pcDNA3.1-HPV6bL1免疫的小鼠可测到L1抗体(滴度为1∶100),IL-4水平明显升高。结论HPV6bL1的重组质粒构建成功,能在真核细胞内表达,并能有效激发小鼠产生体液免疫和细胞免疫。

• 单位
  中国医学科学院; 中国协和医科大学; 北京协和医院