新型冠状病毒N蛋白优势表位区段抗原的克隆表达及其诊断价值初步评价

作者：王坤; 张玲; 王超男; 陈远哲; 范占科; 李垚; 刘念; 冯晓燕^*; 付强^*; 张贺秋^*

来源：生物技术通讯, 2020, 31(06): 670-674.

• 新型冠状病毒
• N蛋白
• 优势表位区段抗原
• 诊断

目的:制备高活性新型冠状病毒N蛋白的优势表位区段抗原,并初步评价该抗原在新型冠状病毒肺炎诊断中的应用价值。方法:利用生物学软件分析N蛋白的B细胞表位分布,选取含有优势表位的抗原区段,然后用分子生物学技术进行克隆表达获得纯化抗原,ELISA初步评价该优势表位区段抗原的检测性能。结果:经过分析筛选确定15～215 aa为优势表位抗原区段,并获得了高效表达抗原。经过Biocore结合实验,确定优势表位区段抗原NP15-215可以与新型冠状病毒肺炎患者血清样本发生特异性抗原抗体反应。基于该抗原建立的IgM和IgG间接ELISA方法,对临床样本的检测灵敏度分别为60.87%、95.65%,特异性分别为90%、100%。NP-IgM检测的AUC值为0.797,NPIgG检测的AUC值为0.998。结论:优势表位区段抗原NP15-215可用于NP抗体检测,利用该抗原建立的NP-IgM/IgG间接ELISA检测方法可以很好地区分新型冠状病毒肺炎患者和健康者。

• 单位
  滨州医学院