大鼠脑皮质微血管内皮细胞的原代培养和鉴定

作者：李正伟; 卞红强; 罗正利; 王胜; 王煜; 陈劲草

来源：华中科技大学学报(医学版), 2012, (05): 585-588.

• 大鼠
• 微血管内皮细胞
• 原代培养
• 细胞鉴定 rat
• microvascular endothelial cells
• primary culture
• cell identification

目的分离、培养、鉴定大脑皮质微血管内皮细胞(brain microvaseular endothelial cells,BMECs),旨在建立一种可以有效获取较高纯度和产量的BMECs的方法。方法取出生3～5dSD大鼠,采用匀浆、二次酶消化、梯度离心获得较纯的脑微血管段后,接种于明胶包被的培养板中进行原代培养,倒置相差显微镜观察细胞的形态学特性,细胞免疫荧光化学染色检测血管内皮细胞特异性标志物Ⅷ因子相关抗原的表达,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长曲线。结果培养6～7d细胞呈典型的短梭形、多角形和"鹅卵石"样。微血管内皮细胞特异性标志物Ⅷ因子相关抗原表达阳性,纯度达(96.70±1.53)%。细胞在6～8d达到生长高峰。结论成功地分离培养出了高纯度的BMECs,为进一步研究BMECs的生物学特性奠定了基础。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院; 武汉市妇女儿童医疗保健中心