摘要
目的:探讨雷公藤多苷对高糖诱导的人肾足细胞增殖、凋亡、炎症的影响及其对miR-150-3p的调控作用。方法:将正常培养的人肾足细胞设为对照组(Control组);采用高糖诱导人肾足细胞建立细胞损伤模型,设为模型组(HG组);用不同浓度(30、60、90mg/ml)雷公藤多苷处理高糖诱导的人肾足细胞(HG+Tri-30组、HG+Tri-60组、HG+Tri-90组);将miR-inhibitor-NC、miR-150-3pinhibitor转染入高糖诱导的人肾足细胞(HG+miR-inhibitor-NC组、HG+miR-150-3pinhibitor组);将miR-mimics-NC、miR-150-3pmimics转染入高糖诱导的人肾足细胞后加入90mg/ml雷公藤多苷处理(HG+Tri-90+miR-mimics-NC组、HG+Tri-90+miR-150-3pmimics组)。采用MTT法检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用ELISA法检测超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用q RT-PCR法检测mi R-150-3p表达量;采用Western blot法检测Cyclin D1、Bcl-2、P21、Bax蛋白表达量。结果:与Control组比较,HG组吸光度(OD)值和Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平降低,凋亡率、miR-150-3p表达水平、P21、Bax蛋白水平以及hs-CRP、IL-1β、TNF-α水平升高(P<0.05);与HG组比较,HG+Tri-30组、HG+Tri-60组、HG+Tri-90组OD值和Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平升高,凋亡率、miR-150-3p表达水平、P21、Bax蛋白水平以及hs-CRP、IL-1β、TNF-α水平降低(P<0.05)。与Control组比较,HG+mi R-inhibitor-NC组OD值、Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平降低,凋亡率、mi R-150-3p表达水平、P21、Bax蛋白水平以及hs-CRP、IL-1β、TNF-α水平升高(P<0.05);与HG+miR-inhibitor-NC组比较,HG+miR-150-3pinhibitor组OD值、CyclinD1、Bcl-2蛋白水平升高,凋亡率、miR-150-3p表达水平、P21、Bax蛋白水平以及hs-CRP、IL-1β、TNF-α水平降低(P<0.05)。与HG+Tri-90+miR-mimics-NC组比较,HG+Tri-90+miR-150-3pmimics组OD值和CyclinD1、Bcl-2蛋白水平降低,miR-150-3p表达水平、凋亡率、P21、Bax蛋白水平以及hs-CRP、IL-1β、TNF-α水平升高(P<0.05)。结论:雷公藤多苷可能是通过抑制mi R-150-3p表达来促进细胞增殖及抑制细胞凋亡和炎症反应,从而减轻高糖诱导的人肾足细胞损伤。
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单位郑州颐和医院; 河南大学