SPAK参与药物抗性癫痫小鼠海马神经元GABA信号的功能重塑

作者：杨丽白; 蔡晓冬; 周列民; 牛争平; 李新毅

来源：中西医结合心脑血管病杂志, 2017, 15(23): 2980-2986.

DOI：10.3969/j.issn.1672-1349.2017.23.011

• 药物抗性癫痫
• γ-氨基丁酸
• SPAK

目的研究氯化锂-匹罗卡品诱导的癫痫(PISE)小鼠海马神经元生理生化的变化,探讨药物抗性癫痫的γ-氨基丁酸(GABA)信号功能的重塑机制。方法将4周6周健康雄性Balb/c小鼠制作成PISE癫痫模型,动物随机分为3组:癫痫模型组、假模型组和空白组,造模后观察1 d(静息期)、14 d(亚急性期)、45 d(慢性自发癫痫发作期)三个时间点,每组每个时间点各6只动物。采用免疫双标观察201S1相关的氨酸/丙氨酸激酶/Na+-K+-2Cl-共转运体1(NKCC1)、SPAK/K+–2Cl-共转运体2(KCC2)在海马组织共表达情况。Western Blot检测各组小鼠海马组织SPAK蛋白表达的差异。用Cl-荧光探针MQAE检测各组神经元Cl-分布情况。免疫共沉淀法检测SPAK与NKCC1、KCC2是否存在相互作用。结果 SPAK/NKCC1、SPAK/KCC2在小鼠海马组织共表达。与空白对照组及假模型组比较,模型组在PISE后1 d、14 d、45 d海马组织SPAK表达均增高,差异有统计学意义(P<0.05);模型组3个时间点比较,14 d高于1 d、45 d,与后者比较差异有统计学意义(P<0.05)。模型组小鼠海马[Cl-]i下降(P<0.05)。慢性自发性癫痫小鼠SPAK与NKCC1、KCC2分别存在相互作用。结论小鼠海马神经元SPAK通过与NKCC1、KCC2相互作用调控[Cl-],参与药物抗性癫痫GABA信号功能的重塑。

• 单位
  山西大医院; 山西医科大学第一医院; 中山大学; 中山大学附属第一医院