混合胶束递送siRNA的体外研究

作者：唐瑶; 孙逊^*

来源：华西药学杂志, 2020, 35(06): 595-598.

DOI：10.13375/j.cnki.wcjps.2020.06.002

• 混合胶束
• 小干扰RNA
• 疫苗
• 树突状细胞
• 溶剂注入法
• 多分散系数
• 摄取能力
• 溶酶体逃逸能力
• 沉默能力
• 荧光定量

目的制备混合胶束(PHM),考察其负载小干扰RNA(siRNA)的能力及所形成的复合物在树突状细胞(DC)上摄取、溶酶体逃逸及沉默的能力。方法采用溶剂注入法制备PHM,胶束亲水端带正电的聚乙烯亚胺与通过静电吸附作用复合siRNA形成载药胶束,考察载药胶束的粒径、多分散系数(PDI)和Zeta电位;通过核酸凝胶电泳确定PHM对siRNA的包载能力;考察复合物在小鼠树突状细胞系DC2.4上摄取、溶酶体逃逸和沉默的能力。结果 PHM-siRNA的平均粒径为123.7±3.4 nm,PDI为0.212±0.052,Zeta电位为13.4±2.3 mV。核酸凝胶电泳显示:氮磷比(N/P)为8:1时,PHM能完全包载siRNA。制剂在DC2.4细胞上的摄取率为50.79%±5.71%(N/P为8:1)和95.22%±1.27%(N/P为16:1),选择N/P为16:1进行后续实验。共聚焦显微镜观察结果显示:制剂可以在给药后15 h从溶酶体中逃逸出来。实时荧光定量PCR检测到PHM-siRNA对目标基因的沉默效率为66.9%±8.8%。结论 PHM-siRNA均一稳定,在DC2.4细胞上具有较高摄取、溶酶体逃逸及沉默的能力。

• 单位
  四川大学