蟾毒灵通过抑制乏氧状态下的乳酸生成调节M2型巨噬细胞极化逆转结肠癌耐药

作者：贾琳琳; 汪红平; 池华博文; 唐东豪; 曹亚琴; 吴文韬; 李炜; 殷佩浩; 王啟巍; 陈进宝^*

来源：中国临床药理学杂志, 2023, 39(17): 2492-2496.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2023.17.013

• 蟾毒灵
• 乏氧
• 结肠癌
• M2型巨噬细胞
• 耐药
• 乳酸

目的 探讨蟾毒灵(Bu)抑制乏氧状态下乳酸生成调节M2型巨噬细胞极化逆转结肠癌耐药的作用。方法 (1)将HCT116细胞分为常氧组(HCT116N)、乏氧组(HCT116H)和乏氧+BU组(HCT116H+BU),常氧组给予RPMI1640培养基进行培养，乏氧组给予含200μmol·L-1 CoCl2的RPMI1640培养基进行培养，乏氧+BU组给予含25 nmol·L-1 BU的RPMI1640培养基(含200μmol·L-1 CoCl2)进行培养。(2)用佛波酯(200 ng·mL-1)将THP-1诱导48 h后成为M0巨噬细胞；将M0巨噬细胞分为空白组(M0)、常氧对照组(HCT116N-Mφ)、乏氧模型组(HCT116H-Mφ)、乏氧+乳酸抑制剂(Lactate inhibitor)实验组(HCT116H+Lactate inhibitor-Mφ)、乏氧+BU实验组(HCT116H+BU-Mφ),空白组不作处理，常氧对照组给予HCT116N条件培养基培养96 h,乏氧模型组给予HCT116H条件培养基培养96 h,乏氧+乳酸抑制剂实验组给予HCT116 H条件培养基+10μmol·L-1 Lactate inhibitor培养96 h,乏氧+BU实验组给予HCT116H+BU细胞条件培养基培养96 h。HCT116细胞分别用1640培养基及前述各组共培养后的细胞条件培养基配制的不同浓度梯度(0、12.5、25、50和100μmol·L-1)奥沙利铂(OXA)培养48 h。通过流式细胞术、实时荧光聚合酶链反应、酶联免疫吸附法等实验观察M2型巨噬细胞极化状态，细胞计数试剂盒-8法观察极化后的巨噬细胞对耐药的影响。结果 常氧对照组、乏氧模型组的CD11b+CD206+比例分别为(26.83±4.14)%和(38.70±3.40)%,白细胞介素-10(IL-10)表达量分别为(108.00±9.17)和(188.33±8.50)pg·mL-1,转化生长因子β(TGF-β)表达量分别为(180.67±10.07)和(261.67±10.41)pg·mL-1,并且乏氧诱导M2型巨噬细胞极化后促进结肠癌细胞耐药；乏氧+乳酸抑制剂实验组和乏氧模型组IL10表达量分别为(100.33±8.62)和(196.00±8.54)pg·mL-1,TGF-β表达量分别为(137.33±10.26)和(224.00±6.56)pg·mL-1,并且乳酸诱导M2型巨噬细胞极化后对OXA的敏感性降低；乏氧+BU实验组和乏氧模型组的CD11b+CD206+比例分别为(18.78±1.58)%和(34.49±5.07)%,IL-10表达量分别为(89.67±9.61)和(177.00±10.44)pg·mL-1,TGF-β表达量分别为(140.33±10.02)和(224.33±15.04)pg·mL-1,并且Bu抑制M2型巨噬细胞极化后结肠癌细胞增强对OXA的敏感性；乏氧组和乏氧+BU组的乳酸表达量分别为(32.00±6.00)和(59.67±7.51) mmol·L-1。上述指标，组间比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 乏氧结肠癌细胞来源的乳酸可增强M2型巨噬细胞极化促进结肠癌耐药，而蟾毒灵可抑制乏氧下乳酸生成调节M2型巨噬细胞极化进而逆转结肠癌耐药。

• 单位
  上海市普陀区中心医院