益母草碱调节RhoA/ROCK信号通路对多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞自噬和凋亡的影响

作者：尹和芳^*; 吴萍; 胡礼建

来源：中国优生与遗传杂志, 2023, 31(11): 2199-2205.

DOI：10.13404/j.cnki.cjbhh.2023.11.017

• 益母草碱
• RhoA/ROCK
• 多囊卵巢综合征
• 卵巢颗粒细胞自噬
• 凋亡

目的 探讨益母草碱（Leo）调节RhoA/ROCK信号通路对多囊卵巢综合征（PCOS）大鼠卵巢颗粒细胞（GCs自噬和凋亡的影响。方法 将SD大鼠随机分为正常组（NC组）和模型组（PCOS组），分离卵巢GCs,H-E染色观察其形态；FSHR免疫荧光鉴定PCOS大鼠卵巢GCs。不同浓度的Leo处理PCOS大鼠卵巢GCs,CCK-8法检测细胞增殖并筛选最佳药物浓度。将PCOS大鼠GCs随机分为模型组（PCOS组）、益母草碱低剂量组（Leo-L组）、益母草碱中剂量组（Leo-M组）、益母草碱高剂量组（Leo-H组）、益母草碱高剂量组+RhoA/ROCK激活剂组（Leo+LPA组），流式细胞术检测细胞凋亡率；透射电子显微镜检测细胞自噬；Western blot检测Bax、Cleaved-Caspase-3、Bcl-2、Beclin1、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达。结果 与NC组比较，PCOS组可见大小不等的囊性卵泡，且卵巢GCs数增多（P<0.05）;PCOS大鼠FSHR阳性率达92.13%，即成功分离卵巢GCs;Leo处理PCOS卵巢GCs后，细胞凋亡率、Bax、Cleaved-Caspase-3、Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达及MDA含量显著降低，细胞OD值、Bcl-2蛋白表达及GSH、SOD、GSH-PX含量显著增加，且呈浓度依赖性（P<0.05）;LPA逆转了Leo对PCOS大鼠卵巢GCs凋亡和自噬的抑制作用。结论 Leo通过抑制RhoA/ROCK信号通路抑制PCOS大鼠中GCs凋亡和自噬。