基于“肠道菌群-肠-脑轴”探讨半夏泻心汤改善大鼠糖尿病认知功能障碍作用机制

作者：徐欢; 刘燕凤; 杨超茅; 杨志新^*

来源：广州中医药大学学报, 2022, 39(09): 2115-2122.

DOI：10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2022.09.025

• 半夏泻心汤
• 糖尿病
• 认知功能障碍
• 肠道菌群
• T淋巴细胞亚群
• 自噬
• PKA-CREB通路
• 大鼠

【目的】观察半夏泻心汤对糖尿病认知功能障碍大鼠的治疗作用及机制。【方法】实验分为5组，即空白组，模型组，半夏泻心汤低、中、高剂量组和二甲双胍组，每组10只大鼠。除空白组，其余各组大鼠构建糖尿病认知功能障碍模型。半夏泻心汤低、中、高剂量组分别对应灌胃半夏泻心汤煎液0.425、0.85、1.70 g·kg-1·d-1，二甲双胍组灌胃二甲双胍0.30 g·kg-1·d-1，模型组及空白组大鼠均灌胃等体积的生理盐水。每日1次，连续28 d。给药结束后，检查大鼠空腹血糖值，Morris水迷宫试验评价大鼠认知功能，流式细胞术检测血清T淋巴细胞亚群，蛋白质免疫印迹法检测脑组织微管相关蛋白轻链3(LC3)、Beclin-1蛋白表达，16S-rDNA测序肠道菌群结构，实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测脑组织蛋白激酶A(PKA)、环腺苷酸(cAMP)反应元件结合蛋白(CREB)m RNA表达。【结果】与空白组比较，模型组大鼠空腹血糖值升高，Morris水迷宫试验逃避潜伏期升高、穿越目标区次数减少(P<0.05)，表明模型制备成功。半夏泻心汤低、中、高剂量组大鼠逃避潜伏期缩短、穿越目标区次数增加，空腹血糖值降低，CD8+T细胞比例增加、CD4+T细胞比例和CD4+/CD8+比值降低，LC3-Ⅱ/LC3-Ι比值和Beclin-1蛋白表达水平降低，肠道Chao 1和Shannon指数增加，厚壁菌门(Firmicutes)、乳酸杆菌属(Lactobacillus)、密螺旋体属(Treponema)丰度增加及拟杆菌门(Bacteroidetes)、普氏菌属(Prevotella)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)丰度降低，脑组织PKA、CREB mRNA表达水平升高，与模型组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，呈剂量依赖性，且疗效和二甲双胍组相当。【结论】半夏泻心汤可改善大鼠糖尿病认知功能障碍，其机制可能与调节肠道菌群，增强细胞免疫功能，并抑制神经细胞自噬、激活脑组织PKA-CREB信号通路进而保护神经功能有关。