摘要

利钠肽(NP)具有促进机体脂肪分解的作用,但其半衰期受利钠肽受体C(NPRC)表达水平调控,通过免疫途径中和机体NPRC有望延长NP发挥作用的时间。本研究根据大肠杆菌对密码子的偏爱性对绵羊NPRC胞外区基因进行密码子优化,通过全基因合成技术合成优化后的NPRC胞外区(NPRCo)基因并构建大肠杆菌表达载体pET28a(+)-NPRCo。经IPTG诱导后NPRCo在E.coli BL21(DE3)中获得表达,经Ni-NTA纯化和Western Blotting鉴定获得重组NPRC胞外区(rNPRCo)。选取16只2月龄左右雌性阿勒泰羊,随机分为试验组和对照组,分别于颈部皮下免疫rNPRCo 200μg/只或生理盐水。2周后加强免疫1次(100μg/只)。分别于免疫前、免疫后第15天、第30天、第90天和第180天空腹静脉采集血液,分离血浆用于测定抗体和血液生理生化指标。结果表明,主动免疫rNPRCo后阿勒泰羊可持续产生高水平的抗体;主动免疫rNPRCo对阿勒泰羊血液中葡萄糖、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇浓度均无显著影响,但可显著升高免疫后第15天、第180天时甘油和第180天游离脂肪酸浓度,并显著降低免疫后第180天时血浆中甘油三酯浓度。由此可见,免疫重组绵羊利钠肽受体C胞外区蛋白质对雌性阿勒泰羊脂肪代谢具有一定的调节作用。