牙龈卟啉单胞菌脂多糖对巨噬细胞中铁死亡相关因子表达水平的影响

作者：杜雪纯; 李保胜; 乔树伟; 欧燕珍; 李珍; 孟维艳^*

来源：吉林大学学报(医学版), 2022, 48(05): 1148-1155.

DOI：10.13481/j.1671-587X.20220507

• 巨噬细胞
• 牙龈卟啉单胞菌
• 脂多糖
• 铁死亡
• 活性氧

目的：探讨牙龈卟啉单胞菌脂多糖（P. g-LPS）对巨噬细胞中铁死亡相关因子表达水平的影响，阐明铁死亡相关因子在牙周炎发病机制中的作用。方法：培养小鼠单核/巨噬细胞系RAW264.7细胞，分为实验组和对照组，实验组加入10 mg·L-1P. g-LPS分别处理6、12和24 h，对照组不做任何处理。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测2组RAW264.7细胞中长链酯酰辅酶A合成酶4 (ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4 (GPX4)和转铁蛋白受体1 (TfR1) mRNA表达水平，2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针法检测2组RAW264.7细胞中活性氧（ROS）水平，硫代巴比妥酸（TBA）法检测2组RAW264.7细胞中丙二醛（MDA）水平，亚铁离子荧光探针（FeRhonox-1）法检测2组RAW264.7细胞中亚铁离子（Fe2+）水平，Western blotting法检测2组RAW264.7细胞中ACSL4、GPX4和TfR1蛋白表达水平。结果：与对照组比较，处理6、12和24 h后，实验组RAW264.7细胞中GPX4 mRNA表达水平降低（P<0.05），处理12和24 h后ACSL4和TfR1 mRNA表达水平升高（P<0.05）；处理12和24 h后，实验组RAW264.7细胞中ACSL4和TfR1蛋白表达水平升高（P<0.05）, GPX4蛋白表达水平降低（P<0.05）。与对照组比较，实验组RAW264.7细胞中ROS、MDA和Fe2+水平升高（P<0.05），且随时间增加呈上升趋势。结论：P. g-LPS诱导下RAW264.7细胞中铁死亡相关因子ACSL4和TfR1表达水平升高，而GPX4表达水平降低，并且呈时间依赖性，提示上述铁死亡相关因子的变化可能与牙周炎发病机制有关。

• 单位
  吉林大学口腔医院