miR-455-5p靶向RECK基因对A549细胞迁移及微血管形成的影响

作者：刘翠华; 赵方新; 孙鹏; 红梅; 武建强; 张烜^*

来源：中国生物制品学杂志, 2022, 35(04): 399-406.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003596

• miR-455-5p
• RECK基因
• 非小细胞肺癌
• 迁移
• 微血管形成

目的 探讨miR-455-5p靶向RECK基因对人非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞A549迁移及微血管形成的影响。方法 利用UALCAN网站对TCGA数据库中肺癌miR-455-5p和RECK基因表达数据进行分析，miRanda在线预测miR-455-5p与RECK基因的靶向关系，并通过双荧光素酶报告基因试验进行靶点验证；A549细胞中分别转染miR-455-5p模拟物、抑制剂及阴性对照后，qRT-PCR检测mi R-455-5p及RECK基因mRNA的表达，Western blot法检测RECK、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和MMP9蛋白的表达；TranswellTM小室试验检测A549细胞的迁移能力；ELISA法检测A549细胞培养上清液中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）-A的表达；用A549细胞培养上清液作用人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC），体外微管形成试验检测微血管形成能力。结果 肺癌组织中miR-455-5p表达显著高于正常组织，而RECK基因的表达显著低于正常组织，miR-455-5p在RECK基因的3′-UTR区有结合域，RECK为miR-455-5p直接调控靶基因。miR-455-5p下调靶基因RECK的表达，而上调MMP2、MMP9蛋白表达；miR-455-5p可明显促进A549细胞迁移及分泌VEGF-A，并增强其诱导HUVEC分化成管的能力。结论 mi R-455-5p通过靶向RECK上调MMPs和VEGF-A，来促进NSCLC细胞A549的迁移及微血管形成。

• 单位
  基础医学院; 内蒙古医科大学