慢性乙型肝炎患者血清HBV全长序列分析及复制力评价

作者：纪冬; 刘妍; 王耀; 苏何玲; 思兰兰; 钟彦伟; 徐东平

来源：解放军医学杂志, 2009, (06): 670-674.

• 肝炎
• 乙型
• 慢性
• 序列分析
• DNA
• DNA复制 hepatitis B
• chronic
• sequence analysis
• DNA
• DNA replication
• phenotype

目的分析乙型肝炎患者HBV全长基因组序列并对其复制力进行评价。方法从慢性乙型肝炎患者血清中提取HBV病毒DNA,PCR扩增HBV全长基因组,克隆到pGEM-Teasy载体中,每个样品挑选5～10个克隆测序,分析基因型以及全长基因组耐药相关的突变位点,并对个别位点进行定点突变。将克隆到pGEM-Teasy载体中的全长HBV基因组经BspQI/ScaI双酶切后,转染入肝癌细胞系HepG2、Huh7。转染3d后检测上清HBsAg表达量及细胞内HBV复制中间体核心颗粒DNA载量,分析全长HBV基因组的复制力(1.0倍HBV复制模型)。结果从2份慢性乙型肝炎患者血清中成功获得5条HBV全长克隆,来自同一...

• 单位
  解放军第302医院