摘要
目的探讨肌腱蛋白C (TNC)在百草枯(PQ)中毒小鼠肺损伤中的表达及作用。方法 C57BL/6雄性小鼠经腹腔注射30 mg/kg PQ建立动物模型,对照组为同等剂量生理盐水腹腔注射。分别于接触PQ后2 d、7 d、14 d和28 d,麻醉后处死小鼠取出肺组织,苏木精-伊红染色法(HE)和胶原染色证明模型成功。逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、Western blotting和免疫组化(IHC)方法检测TNC基因和蛋白在小鼠肺组织中随时间的表达规律及定位,Western blotting检测核因子-κB p65 (NF-κB p65),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子-β1 (TGF-β1)在肺组织中随时间的表达规律。结果 TNC蛋白表达在接触PQ后2 d升高,7 d达高峰,之后表达降低,在14 d和28 d与对照组比较无统计学差异。TNC基因表达高峰提前到2 d,之后降低,在14 d和28d表达与对照组比较无统计学差异。IHC染色发现,TNC主要分布于损伤的肺泡间质区。NF-κB p65在接触PQ后2 d出现表达峰值,α-SMA在接触后14 d和28 d高表达,TGF-β1高表达贯穿整个实验始终(P <0.05)。结论首次发现TNC在PQ中毒诱发肺损伤过程中的表达及表达规律,提示TNC参与了此过程并发挥重要作用。
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单位中国医科大学附属第一医院