H9N2亚型禽流感病毒河南株NP基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：陈红英; 方忠意; 崔保安; 李新生; 夏平安; 金钺

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2009, 37(10): 19-24.

DOI：10.13207/j.cnki.jnwafu.2009.10.029

• 禽流感病毒
• 河南株
• 核蛋白
• 克隆
• 表达 avian influenza virus
• henna isolate
• nucleoprotein
• cloning
• expression

【目的】克隆H9N2亚型禽流感病毒(AIV)河南株核蛋白(NP)基因,并将NP主要抗原表位区在大肠杆菌中进行表达,为禽流感基因工程诊断抗原的制备和开发奠定基础。【方法】根据GenBank公布的禽流感病毒NP基因序列设计引物,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从H9N2亚型AIV河南株感染的鸡胚尿囊液RNA中扩增AIV河南株NP全基因,将扩增的PCR产物克隆到pGEM-T easy载体并进行测序。通过PCR和酶切方法将NP主要抗原表位区亚克隆到原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28NP,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达重组蛋白。【结果】测序结果...

• 单位
  河南农业大学