奥沙利铂促进过表达GSDME的结直肠癌Lovo细胞发生细胞焦亡

作者：陈婧; **; 张伟华; 张春泽^*; 任君旭^*

来源：中国肿瘤生物治疗杂志, 2020, 27(08): 884-888.

• 细胞焦亡
• GSDME
• 奥沙利铂
• 结直肠癌
• 生物标志物

目的:观察过表达Gasdermin蛋白E(gasdermin E, GSDME)基因的结直肠癌Lovo细胞经奥沙利铂处理后发生细胞焦亡的现象。方法:通过q PCR检测结直肠癌细胞株Lovo、正常结直肠上皮细胞HCOEPIC中GSDME基因的表达水平,构建过表达野生型和突变型GSDME的GSDME-WT和GSDME-D270A重组质粒,包装为相应慢病毒后感染Lovo细胞构建GSDME稳定高表达细胞株,Western blotting检测WT、D270A和空载体组中GSDME表达水平。用不同浓度奥沙利铂(0、4、8、16、32、64μg/ml)作用于WT、D270A组Lovo细胞和HCOEPIC细胞,显微镜下观察细胞的形态变化。结果:GSDME在HCOEPIC细胞中表达显著高于Lovo细胞(P<0.01)。成功构建GSDME-WT和GSDME-D270A高表达重组质粒和相应的Lovo细胞株,与空载体组相比,WT和D270A组Lovo细胞中GSDME表达水平明显升高(均P<0.05)。镜下观察发现,64μg/ml奥沙利铂处理各组细胞9和12 h时,WT组的Lovo细胞和HCOEPIC细胞体积逐渐增大并向一侧"吹泡",表现出明显的细胞焦亡现象,细胞焦亡率显著高于无奥沙利铂处理的对照组[Lovo细胞:(7.405±1.010)%vs(3.441±0.401)%,P<0.05;HCOEPIC细胞:(7.203±1.020)%vs(4.201±0.302)%,P<0.05]。结论:奥沙利铂促进过表达GSDME基因的结直肠癌Lovo细胞发生细胞焦亡。

• 单位
  基础医学院; 河北北方学院; 天津市人民医院