牛支原体deoC蛋白多抗的制备及生物信息学分析

作者：蔡伟; 胡永浩^*

来源：甘肃农业大学学报, 2023, 58(03): 23-32.

DOI：10.13432/j.cnki.jgsau.2023.03.004

• 牛支原体
• deoC基因
• 基因克隆
• 生物学信息分析

【目的】研究牛支原体（Mycoplasma bovis,M. bovis）武威株脱氧核糖磷酸醛缩酶（Deoxyribose-phosphate aldolase protein,DERA）基因序列特征及其分布位置，对免疫原性做初步探究。【方法】参照GenBank PG45菌株deoC基因（登录号：CP002188.1）设计引物PCR扩增deoC基因全长，构建原核表达载体pET-deoC。经感受态BL21转化IPTG诱导后纯化蛋白免疫新西兰兔制备多抗血清，应用Western blot与间接ELISA检测对其免疫原性和细胞内的分布进行初步研究。【结果】deoC基因全长为669 bp，重组蛋白为可溶性形式；Western blot与间接ELISA结果具有较高的免疫原性，在细胞质中分布多于细胞膜。与地方株同源性均为95.4%，亲水性蛋白，无信号肽和跨膜结构，存在磷酸化位点和糖基化位点，混合型二级结构。【结论】deoC具有良好的免疫原性，为研究牛支原体抗原提供了一定的理论基础依据。

• 单位
  甘肃农业大学