猪流行性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

作者：杨峰; 杨猛超; 周宏超; 许信刚; 张为民; 张琪

来源：动物医学进展, 2018, 39(07): 1-5.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2018.07.001

• 猪流行性腹泻病毒
• 实时荧光定量RT-PCR
• 检测

为建立一种特异、灵敏、量化、快速的猪流行性腹泻病毒(PEDV)检测方法,设计1对PEDV N基因的特异性引物,建立Eva Green染料的实时荧光定量RT-PCR的检测方法,并对疑似PEDV感染的临床样品进行检测。结果显示,所建立的实时荧光定量RT-PCR方法的标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数R2=0.999;不与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)发生交叉反应,具有较强的特异性;灵敏度比常规RT-PCR方法高100倍;重复性试验的变异系数均小于5%,重复性良好。对43份临床样品进行检测,结果比普通PCR多检出2份阳性。结果表明,建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法在特异性、灵敏度和重复性方面都很好,可用于临床PEDV检测。

• 单位
  西北农林科技大学